EXTRAÇÃO DE DNA DA BANANA

Objetivo

Extrair o DNA da banana que pode ser visualiza a olho nu;

Observar a estrutura do DNA no microscópio;

Descrição

As membranas, celular e nuclear são compostas principalmente por lipídios. As proteínas encontram-se aprisionadas na

bicamada lipídica. As paredes celulares das células vegetais são compostas essencialmente por polissacarídeos. As pequenas

estruturas celulares são compostas por substâncias com diferentes propriedades químicas, pelo que os procedimentos

experimentais devem ser definidos de modo a separar um determinado constituinte celular das restantes partes, sem causar

muitos danos.

Procedimento

1. Coloque a fruta, previamente lavada em saco plástico zip loc e esmague-a com o punho (cuidado para não rasgar o saco)

até ficar um extrato homogêneo;

2. Adicione a solução extratora ao conteúdo do saco, misture tudo apertando com as mãos homogeneizando;

3. Derrame o extrato no filtro com o aparato filtrante e deixe filtrar num recipiente (béquer ou copo);

4. Encha a menos da metade, um tubo de ensaio com o filtrado;

5. Derrame devagar o álcool gelado do tubo de ensaio (deixando-o escorrer vagarosamente pela borda) a fim de se formar

duas fases, a superior, alcoólica e a inferior, a aquosa. O volume adicionado do álcool deve ser aproximadamente o mesmo

volume do filtrado;

6. Mergulhe o bastão ou palito dentro do tubo até o local onde se encontra a solução mais turva (o filtrado com moléculas de

DNA);

7. Retire um pouco dos filamentos e coloque-os em uma lâmina, pingue uma gota da solução extratora, cubra com uma

lamínula e em seguida observe ao microscópio.

8. Desenhe em forma de esquema o observado.

Análise

O detergente dissolve as membranas lipídicas além de desintegrar os núcleos e os cromossomos das células da cebola,

liberando o DNA. Com a ruptura das membranas, o conteúdo celular, incluindo DNA e proteínas, se soltam e se dispersam na

solução. A adição de sal, no início da experiência, proporcionou ao DNA um ambiente favorável. O sal contribui com íons

positivos Na+ que neutralizam a carga negativa do DNA. Nessa forma, O DNA precipita na solução aquosa.

O álcool gelado, além de proporcionar uma mistura heterogênia (bifásica), em ambiente salino, faz com que as moléculas de

DNA se aglutinem, formando uma massa filamentosa e esbranquiçada.

O DNA não se dissolve no álcool, na concentração e na temperatura que se usou neste experimento. Pelo fato do DNA ser

menos denso que a água e a mistura aquosa dos restos celulares, ele se localiza na interface da fase alcoólica e aquosa.

VIDEO  EXTRAÇÃO DE DNA - UNICAMP

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